Abnormal expression of TBX4 during anorectal development in rat embryos with ethylenethiourea-induced anorectal malformations

BACKGROUND: To assess the expression of T-box transcription factor 4 (TBX4) during the anorectal development in normal and ethylenethiourea (ETU)-induced anorectal malformations (ARM) rat embryos. METHODS: Anorectal malformations was induced by ETU on the 10th gestational day (E10) in rat embryos. Spatiotemporal expression of TBX4 was evaluated in normal (n = 490) and ETU-induced ARM rat embryos (n = 455) from E13 to E16 by immunohistochemical staining, Western blot analysis and real-time RT-PCR. RESULTS: In the normal embryos, immunohistochemical staining revealed that TBX4 expression was detected in the epithelium of hindgut and urorectal septum (URS) on E13. TBX4-immunopositive cells were increased significantly in the epithelium of hindgut and URS, the future anal orifice part of cloacal membrane on E14. On E15, abundant stained cells were observed in the rectum, URS and dorsal cloacal membrane and the expression of positive cells reached its peak. On E16, only sporadic positive cells were distributed in the epithelium of the distal rectum. In the ARM embryos, the hindgut/rectum, URS and dorsal cloacal membrane were faint for TBX4 immunohistochemical staining. In the normal group, TBX4 protein and mRNA expression showed time-dependent changes in the hindgut/rectum from E13 to E16 on Western blot and real-time RT-PCR. On E13 and E15, the expression level of TBX4 mRNA in the ARM group was significantly lower than that in the normal group (P < 0.05). On E15, the expression level of TBX4 protein in the ARM group was significantly lower than that in the normal group (P < 0.05). CONCLUSIONS: The expression of TBX4 was downregulated in ETU-induced ARM embryos, which may play important roles in the pathogenesis of anorectal development.

HPLC method for ethylenethiourea in biological and environmental samples

@#<p style="text-align: justify;"><strong>OBJECTIVE:</strong> In view of both the economic importance of ethylenebisdithiocarbamate (EBDC) fungicides in the current agricultural practice and the potential health hazards associated with ethylenethiourea (ETU) exposure, this study aimed to develop and validate a high-pressure liquid chromatography (HPLC) method to determine ETU in biological and environmental samples.</p><p style="text-align: justify;"><strong>METHODS:</strong> The samples were pre-treated according to sample types and were analyzed for ETU using a reversed-phase HPLC system (JASCO?) equipped with UV detector set at 230 nm using C18 bonded silica column and a mobile phase of 0.05M ammonium acetate in methanol (95:5).</p><p style="text-align: justify;"><strong>RESULTS:</strong> The method showed a limit of detection of 0.2 ug/L, with a precision of 3.33 to 12.86 %CV and an accuracy of >90% at 1, 10 and 100 ug/L of ETU in all sample types. The calibration curve was linear from 1 to 200 ug/L for blood, air and water samples and 1 to 2000 ug/L for urine.</p><p style="text-align: justify;"><strong>CONCLUSION:</strong> This method showed an acceptable accuracy, precision, sensitivity and specificity and was used subsequently to determine ETU levels in blood, urine, air, soil and water samples among banana plantation workers.</p>

Determinación de etilentiourea en acelgas tratadas con Zineb: Efecto del calor húmedo por ebullición / Determination of ethylenethiourea in chard treated with Zineb: Effect of wet heat by boiling

El Zineb es un plaguicida perteneciente a la familia de los etilenbisditiocarbamatos (EBDC) ampliamente utilizado en la provincia de Jujuy (Argentina). La toxicidad de este fungicida está dada por la etilentiourea (ETU) que es el principal producto de su degradación. La ETU tiene efectos mutagénicos, teratogénicos y cancerígenos en animales. La EPA la clasifica como probable cancerígeno humano. El objetivo del trabajo fue determinar la transformación del Zineb a ETU en acelgas cultivadas en Jujuy, por efecto del calor húmedo por tratamiento térmico. El método se basó en la extracción de la ETU con agua y su posterior reextracción con diclorometano a pH alcalino. El extracto se purificó por cromatografía en columna de alúmina y la ETU se cuantificó por HPLC con un detector UV-Visible a 232 nm. Para cumplir con el objetivo planteado se realizó un cultivo experimental de acelgas a las que se aplicó el fungicida Zineb, el cual luego se cuantificó a diferentes periodos de tiempo. La ETU se cuantificó con y sin aplicación de calor húmedo. La concentración de ETU en las acelgas sometidas a tratamiento térmico fue de 8,07 mg/kg y transcurridos 30 días disminuyó a 0,05 mg/kg, lo que representa una disminución de más del 99 % respecto a la concentración inicial. Simultáneamente, se determinó la concentración de Zineb en las acelgas y se obtuvo, inicialmente, 44 mg/kg y luego de 36 días la concentración de Zineb disminuyó a 3,83 mg/kg, lo que representa una disminución del 91 % respecto a la concentración del plaguicida al inicio. La detección de ETU en acelgas sometidas a tratamientos térmicos confirma la transformación del fungicida Zineb a un producto de degradación clasificado según el IARC en el grupo 3. Esto pone en discusión la reglamentación Argentina vigente, por cuanto al finalizar los tiempos de carencia no se evalúan la presencia de metabolitos o productos de degradación potencialmente tóxicos.

Zineb is a pesticide belonging to the family of ethylenebisdithiocarbamates (EBDC) widely used in the province of Jujuy, Argentina. The toxicity of this fungicide is given by the ethylenethiourea (ETU) which is the main product of degradation. The ETU has mutagenic, teratogenic and carcinogenic effects in animals. The EPA classifies it as a probable human carcinogen. The aim of the study was to determine the transformation of Zineb to ETU in cultivated chards in Jujuy, by treatment with humid heat. The method is based on extraction of ETU with water and subsequent extraction of the aqueous phase with dichloromethane. The extract was cleaned by alumina column chromatography and the ETU was quantified by HPLC with a UV-Visible detector at 232 nm. An experimental cultivation of chards was carried out and the Zineb fungicide was applied and then quantified at different time periods. The ETU was quantified with and without application of moist heat. The concentration of ETU in heat treated chards was 8.07 mg/kg and after 30 days decreased to 0.05 mg/kg, representing a decrease of more than 99 % over the initial concentration. Simultaneously, Zineb concentration in chard was initially determined as 44 mg/kg and, 36 days later, the Zineb concentration decreased to 3.83 mg/kg, representing a 91% decrease with respect to the concentration of the pesticide at the beginning. Detection of ETU in chards subjected to heat treatment confirms the transformation of the fungicide Zineb to a degradation product classified by the IARC as group 3. This puts into discussion the current Argentine regulations since, at the end of the deficiency times the presence of potentially toxic metabolites or degradation products is not evaluated.

Is it possible folic acid reduce anorectal malformations ethylenethiourea induced in rats?

PURPOSE: To investigate the effect of folic acid (FA) in an experimental model of anorectal malformations (ARMs) ethylenethiourea (ETU) induced.METHODS:Eight female Wistar rats were divided randomly in two groups. Group A - ETU; Group B - FA+ETU; Dams from group B received daily, since two weeks before pregnancy to the end of pregnancy, FA (50mg/kg) by gavage. Dams from groups A and B, received 1% ETU (125mk/kg) by gavage on gestational day (GD) 11. Their fetuses were harvested by cesarean section on GD21 and were examined looking for ARMs. The thickness of anal stratified squamous epithelium (ASSE) and intestinal epithelium (IE) were analyzed. p<0.05*.RESULTS:One hundred and one embryos were harvested. The number of embryos; number of ARMs; mean statistical % (± SD) were determined to be, respectively: ETU - 49 [30;65% (±24%)] versus FA+ETU - 52 [1;02% (±3%)] (p=0.025). AMRs were significantly lower in FA+ETU group than in ETU group (p=0.025). The thickness (µm) of ASSE (± SD) and IE (± SD) were measured, respectively: ETU - [27.75 (±0.56) and 18.88 (±0.93)] versus FA+ETU - [28.88 (±0.61) and 21.11 (±0.16)] (p=0.001). The thickness of IE was significantly enlarged when FA was given (p=0.001).CONCLUSION:Folic acid reduces the number and enlarged the IE of ARMs ETU-induced.

Hepatic damage in newborns from female rats exposed to the pesticide derivative ethylenethiourea / Lesões hepáticas em recém-nascidos de ratas expostas ao derivado de agrotóxico etilenotioureia

PURPOSE: To evaluate hepatic morphological-histological abnormalities in newborns from female rats exposed to ethylenethiourea. METHODS: A randomized study was conducted on fifty-five newborn Wistar rats were studied: 34 in the experimental group, whose mothers had been exposed to 1% ethylenethiourea; and 21 in the control group, whose mothers had received 0.9% physiological solution. The solution was administered via gavage on the 11th day of gestation. Cesarean section was performed on the 20th day of gestation. The newborns' livers were examined and any morphological-histological abnormalities were registered. The presence of megakaryocytes was quantified in 50 microscope fields, as the total number of these cells per mm². RESULTS: The entire experimental group presented abnormalities of embryonic formation, with musculoskeletal anomalies, digestive system anomalies, hepatic congestion and friability, hydrops and delayed intrauterine growth. The histopathological analysis showed that morphological-histological hepatic destructuring had occurred in all entire experimental with removal of the hepatic trabeculae and severe hepatic megakaryocytosis. The mean megakaryocyte density ranged from 107.9 to 114.2 per mm², and it was eight times greater than in the control group, thus characterizing a situation of extramedullary hematopoiesis. CONCLUSION: The fetal exposure to ethylenethiourea caused hepatic damage characterized by severe extramedullary hematopoiesis.

OBJETIVO: Avaliar alterações hepáticas morfohistológicas em recém-nascidos de ratas prenhes expostas à etilenotioureia. MÉTODOS: Realizado ensaio randomizado em animais de experimentação, onde foram estudados 55 recém-nascidos de ratas Wistar, 34 do Grupo Experimento, expostas a etilenotioureia 1% e 21 do Grupo Controle, em que a rata prenhe recebeu solução fisiológica 0,9%, ambos por gavagem no 11º dia de gestação. Realizada no 20º dia de gestação cesariana, analisados os fígados dos recém-nascidos e registradas as alterações morfohistológicas. Realizou-se a quantificação dos megacariócitos em 50 campos microscópicos, avaliando a quantidade total destas células por mm². RESULTADOS: Todos os recém-nascidos do Grupo Experimento apresentaram alterações na formação embrionária, com anomalias musculoesqueléticas, anormalidades do sistema digestório, congestão e friabilidade hepática, hidropisia e crescimento intrauterino retardado. A análise histopatológica mostrou desestruturação hepática morfohistológica em todos os recém-nascidos expostos à etilenotioureia, com destrabeculação dos hepatócitos e intensa megacariocitose hepática, apresentando média da densidade de megacariócitos de 107,9 até 114,2 por mm² sendo cerca de oito vezes maior que no Grupo Controle, caracterizando hematopoese extramedular. CONCLUSÃO: A exposição fetal a etilenotioureia provocou danos hepáticos caracterizados pela intensa hematopoese extramedular.

Abnormalities of digestive tract innervation in rat fetus treated with ethylenethiourea / Anomalias da inervação do trato digestório de fetos de ratas expostas à etilenotioureia

PURPOSE: The pathophysiology of abnormalities associated with myenteric plexus lesions remains imperfectly understood. Such abnormalities have been correlated with subocclusive intestinal conditions in children with Hirschsprung's disease, cases of chronic constipation and, postoperatively, in cases of anorectal anomalies. This study evaluated abnormalities of the myenteric plexus in fetus from female rats that received ethylenethiourea. METHODS: Female rats were exposed to ethylenethiourea on the 11th day of pregnancy (experimental group) or to 0.9 percent physiological solution (control group). Abnormalities were only found in the experimental group. The digestive tract muscle layer was analyzed morphometrically and changes to the frequencies of nerve plexus cells and interstitial cells of Cajal were evaluated, using hematoxylin-eosin, S-100 protein, neuron-specific enolase and C-Kit, respectively. RESULTS: Muscle and skeletal abnormalities were observed in 100 percent, anorectal anomalies in 86 percent, absent tail in 71 percent, short tail in 29 percent, duodenal atresia in 5 percent, esophageal atresia in 5 percent and persistent omphalomesenteric duct in 5 percent. Histopathological analysis showed a thinner muscle layer associated with lower frequencies of ganglion cells and interstitial cells of Cajal, in all gastrointestinal tract. CONCLUSION: Severe nerve plexus abnormalities associated with muscle layer atrophy were observed throughout the gastrointestinal tract in newborn rats exposed to ethylenethiourea.

OBJETIVO: As anomalias associadas a lesões dos plexos mioentéricos permanecem sem plena compreensão da sua fisiopatologia. Alterações nos plexos nervosos têm sido correlacionadas com quadros suboclusivos intestinais em crianças portadoras de doença de Hirschsprung, em constipação crônica e no pós-operatório de anomalias anorretais. Este estudo avaliou as anomalias do plexo mioentérico em fetos de ratos fêmea que ingeriram etilenotioureia (ETU). MÉTODOS: Ratos fêmea foram expostos no 11º dia de gestação a ETU 1 por cento no Grupo Experimento e a solução fisiológica 0,9 por cento no Grupo Controle. Foram observadas anomalias apenas no Grupo experimento, sendo realizada morfometria da camada muscular e avaliadas alterações da frequência celular nos gânglios do plexo mioentérico e nas células intersticiais de Cajal (CIC) utilizando hematoxilina-eosina, P S-100, Enolase Neurônio Específica e C-KIT. RESULTADOS: Foram observadas anomalias musculoesqueléticas (100 por cento), anorretais (86 por cento), ausência de cauda (71 por cento), cauda curta (29 por cento), atresia duodenal (5 por cento), atresia esofágica (5 por cento) e conduto onfalomesentérico persistente (5 por cento). A análise histopatológica mostrou adelgaçamento da camada muscular associada às alterações da frequência das células ganglionares e das CIC em todos os segmentos do trato gastrointestinal. CONCLUSÃO: Foram observadas alterações graves nos plexos nervosos associadas ao adelgaçamento da camada muscular de todo o trato gastrointestinal nos fetos expostos a ETU.

Study of the density of ganglion cells in the terminal bowel of rats with anorectal malformations

PURPOSE: To study the ganglion cells (GC) in the terminal bowel of rats with ethylenethiourea (ETU) induced anorectal malformations (ARM). METHODS: The animals were divided into three groups: Group A - normal fetuses from pregnant rats that were not administered ETU; Group B - fetuses without ARM born from pregnant rats that were administered ETU and Group C - fetuses with ARM born from pregnant rats that received ETU. ETU was administered on the 11th day of pregnancy at the dose of 125 mg/kg body weight by gastric gavage. The rats had cesarean section on the 21st day of gestation. The fetuses’ terminal bowel tissue was analyzed by immunohistochemistry to demonstrate ganglion cells. RESULTS: Statistically significant differences were found between groups A, B and C regarding ganglion cell densities. Group A had the highest cell density, followed by Group B and the lowest density was found in Group C. CONCLUSION: Ganglion cell densities are decreased in the terminal bowel of rats with ARM.

OBJETIVO: Estudar as células ganglionares (CG) no intestino terminal de ratos portadores de anomalia anorretal (AAR) induzida pela etilenotiouréia (ETU). MÉTODOS: Os animais foram distribuídos em três grupos: Grupo A - fetos normais, obtidos de ratas grávidas às quais não foi administrada ETU; Grupo B - fetos não portadores de AAR obtidos de ratas grávidas às quais foi administrada ETU e Grupo C - fetos portadores de AAR obtidos de ratas grávidas às quais foi administrada ETU. A ETU foi administrada no décimo primeiro dia de gestação na dose de 125 mg/Kg, por gavagem. As ratas foram submetidas à laparotomia e histerotomia para retirada dos fetos no vigésimo primeiro dia de gestação. O intestino terminal dos fetos foi retirado e analisado por imunohistoquímica para pesquisa de CG. RESULTADOS: Foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos A, B e C quanto à densidade de CG. O grupo A apresentou a maior densidade, seguida pelo grupo B, e a menor densidade foi encontrada no Grupo C. CONCLUSÃO: Existe uma menor densidade de CG no intestino terminal de ratos portadores de AAR.

Evaluation of an experimental model for anorectal anomalies induced by ethylenethiourea

PURPOSE: To evaluate an experimental model for anorectal anomalies and their principal associated malformations induced by ethylene thiourea (ETU). METHODS: Rat fetuses were utilized, divided into two groups: experimental group - fetuses from rats that received ETU on the 11th day of gestation at the dose of 125 mg/kg, diluted in distilled water to 1 percent concentration (12.5 ml/kg); and control group - fetuses from rats that received distilled water alone, at a volume of 12.5 ml/kg. On the 21st day of gestation, the animals were sacrificed by hypoxia in a carbon dioxide chamber, followed by laparotomy to remove the fetuses. These were initially examined externally to determine the sex and whether anorectal anomalies and malformations of the vertebral column and tail were present. Then, with the aid of microscopy, the fetuses underwent exploratory laparotomy to characterize the type of anorectal anomaly and investigate urological malformations. RESULTS: None of the fetuses in the control group presented anorectal anomaly, vertebral column malformation or urological structural alterations. In the experimental group, 71 percent presented anorectal anomaly, 80 percent presented vertebral column alterations and 35 percent presented urological alterations. CONCLUSION: The model described was shown to be easy to implement and presented results that allow its use in studying anorectal anomalies and associated malformations.

OBJETIVO: Avaliar o modelo experimental de AAR, induzido pela Etilenotiouréia (ETU), quanto à ocorrência de anomalia anorretal e das principais malformações associadas. MÉTODOS: Foram utilizados fetos de ratos distribuídos em 2 grupos: Grupo experimental - Fetos provenientes de ratas que receberam ETU no décimo primeiro dia de gestação na dose de 125 mg/Kg, diluída em água destilada na concentração de 1 por cento (12,5 ml/Kg) e Grupo controle - Fetos de ratas que receberam somente água destilada num volume de 12,5 ml/Kg. No 21° dia de gestação, os animais foram submetidos à eutanásia por hipóxia em câmara de gás carbônico e laparotomia para retirada dos fetos. Os fetos foram, inicialmente, examinados externamente para determinação do sexo, presença de AAR, de malformações de coluna vertebral e da cauda. A seguir, com o auxílio de microscopia, os fetos foram submetidos a laparotomia exploradora para caracterização do tipo de AAR e investigação de malformações urológicas. RESULTADOS: Nenhum dos fetos do grupo controle apresentou AAR, malformações de coluna vertebral e alterações urológicas estruturais. No grupo experimental, 71 por cento apresentaram anomalia anorretal, 80 por cento apresentaram alterações de coluna vertebral e 35 por cento apresentaram alterações urológicas. CONCLUSÃO: O modelo descrito se mostrou de fácil execução e apresentou resultados que permite o seu emprego no estudo das anomalias anorretais e das malformações associadas.

Avaliação de resíduos de etilenotiouréia (ETU) em frutas comercializadas na cidade de São Paulo / Evaluation of ethylene thiourea (ETU) in fruits traded in the city of São Paulo

Etilenotiouréia (ETU) é uma substância tóxica, formada pela degradação e/ou biotransformação dos fungicidas etilenobisditiocarbamatos (EBDC). Seus resíduos podem ser encontrados em plantas e no ambiente, após o uso de EBDC na agricultura, ou em animais no ser humano, quando expostos a esses produtos. Comprovadamente, a ETU tem a capacidade de induzir tumor na tireóide de roedores e no fígado de camundongo, apresentando evidência suficiente para carcinogenicidade em animais e evidência inadequada para carcinogenicidade em seres humanos. Os objetivos destes estudos foram: validar método analítico para determinação de resíduos de ETU nas matrizes estudadas; verificar a presença de resíduos de ETU em amostras de frutas (mamão, maça e morango), coletadas em diferentes pontos de comercialização da cidade de São Paulo; avaliar os resultados e a contribuição de risco à saúde da população consumidora. Foram analisadas 90 amostras, sendo 30 de cada fruta (maça, mamão e morango), adquiridas em diferentes pontos de comercialização da cidade São Paulo, no período de dezembro de 2005 a dezembro de 2006, distribuídas nas diferentes regiões do referido município e durante as estações do ano. Os parâmetros de validação avaliados foram: seletividade, linearidade, limite de quantificação, limite de detecção, exatidão e precisão. Os estudos de recuperação foram realizados com fortificações em três níveis (1,2 e 10 LQ) em amostras controle. A determinação de resíduos de ETU foi feita por cromatografia a líquido de alto desempenho, com detector de absorção no ultravioleta (HPLC-UV) e cromatografia a líquido acoplada à espectrometria de massas em "tandem" (LC/MS/MS). Como todos os resultados obtidos por HPLC-UV apresentaram níveis de ETU abaixo do LQ limite de quantificação (10,0 micro grama/Kg), as quantificações foram realizadas no LC/MS/MS, com limite de quantificação e de detecção respectivamente de 1,0 micro grama/Kg e 0,5 micro grama/Kg. O método por LC/MS/MS mostrou-se adeq...

Evaluation of efficacy of preservatives associated with Achillea millefolium L. extract against Bacillus subtilis

A eficácia antimicrobiana de conservantes empregados em formulações cosméticas foi avaliada usando Phenova® e Imidazolinidil uréia que inibiram o crescimento de Bacillus subtilis no extrato de Achillea millefolium L. e Nipagin®/ Nipasol® 0,2 por cento em propilenoglicol não apresentaram efeito microbicida.

Avaliação de resíduos de ditiocarbamatos e etilenotiouréia (ETU) em mamão e sua implicação na saúde pública / Evaluation of dithiocarbamate and ethylenethiourea (ETU) residues in papaya, and their implication for public health

Etilenotiouréia é uma substância tóxica, formada pela degradação e/ou biotransformação dos fungicidas etilenobisditiocarbamatos (EBDCs), utilizados em alimentos, e pode representar um risco à populaçãoconsumidora. Os objetivos deste estudo foram: validar métodos analíticos de resíduos de ditiocarbamatos e deETU em mamão; determinar os resíduos de mancozebe e de ETU em mamão Carica papaya L, avaliar os teoresencontrados e o risco à saúde da população. A determinação de ditiocarbamatos foi feita por espectrofotometria e a de ETU, por cromatografia líquida de alta eficiência. Foram analisadas amostras tratadas com mancozebe e testemunhas, procedentes de três localidades representativas da cultura de mamão. Os resultados das recuperações foram de 70 a 110% para mancozebe e de 80 a 110% para ETU, com coeficientes de variação de 4,8 a 13,2% para mancozebe e de 3,7 a 13,3% para ETU, todos satisfatórios. O limite de quantificação do método foi de 0,5mg/kg para mancozebe, e 0,01mg/kg para ETU. As amostras tratadas apresentaram resíduos de ETU de 0,01mg/kg a 0,32 mg/kg e de mancozebe de 0,5 mg/kg a 2,1 mg/kg. A presença de ETU em mamão alerta para anecessidade do conhecimento dos níveis presentes nos alimentos consumidos pela população

Persistence and degradation of metalaxyl, mancozeb fungicides and its metabolite ethylenethiourea in soils.

The degradation pattern of metalaxyl, mancozeb and its metabolite ethylenethiourea (ETU) residues indicated a close correspondence to first order exponential degradation kinetics in soils. Degradation of fungicides in soils was predominantly biological as well as chemical in nature. Slower degradation ofmetalaxyl was noticed in the soils and their half-life values were higher than mancozeb and ETU as evident by wide range of half-life values from 41.24 to 165.11 days. In case of metalaxyl, Hiriyur soil was found to be superior in degrading the metalaxyl. Lower persistence of mancozeb and ETU was observed in soils resulting in rapid rate of degradation at smaller half-life values as compared to metalaxyl indicating the faster degradation of mancozeb and ETU. In mancozeb applied soils, the ETU formation was increased up to 30 days of incubation and thereafter it declined. Amongsoils, degradation of either mancozeb or ETU is not influenced by soil types. However, mancozeb persistence was higher in Hiriyur soils than Chettalli and Bangalore soils.

Avaliaçäo de resíduos de ditiocarbamatos e etilenotiouréia (ETU)em fruta e sua implicação na saúde pública / Evaluation of dithiocarbamate and ethylenethiourea (ETU) residues in fruit and their implication for public health

Etilenotiouréia (ETU) é uma substância tóxica, formada pela degradação e/ou biotransformação dos fungicidas etilenobisditiocarbamatos (EBDC), razoavelmente estável, solúvel em água e pode representar um risco à população consumidora de frutas e outros alimentos. Apresenta evidência suficiente para carcinogenicidade em animais e evidência inadequada para carcinogenicidade em seres humanos. Os objetivos deste estudo foram: estudar e validar métodos analíticos para determinação de resíduos de ditiocarbamatos e de ETU em mamão; determinar os resíduos remanescentes de aplicação de EBDC (mancozebe) em culturas de mamão da espécie Carica papaya L e de seu metabólito ETU; determinar a dissipação desses resíduos, dias após a aplicação de mancozebe; avaliar os teores encontrados e o risco à saúde da população. A determinação de ditiocarbamatos foi feita por espectrofotometria e a de ETU, por cromatografia a líquido de alta eficiência. Foram analisadas amostras tratadas e não tratadas (testemunhas) com mancozebe, procedentes de três localidades representativas da cultura de mamão: Lins-SP, Linhares-ES, Extremo sul da Bahia. Os métodos analíticos avaliados apresentaram resultados satisfatórios. As recuperações variaram de 70 a 110 % para mancozebe e de 80 a 110 % para ETU, com coeficientes de variação de 4,8 a 13,2 % para mancozebe e de 3,7 a 13,3 % para ETU, dependendo do nível fortificado. O limite de quantificação do método foi de 0,5 mg/kg para mancozebe, e 0,01mg/kg para ETU. Todas as amostras tratadas com mancozebe apresentaram resíduos de ETU que variaram de 0,01 mg/kg a 0,32 mg/kg. Os níveis de mancozebe variaram de 0,5 mg/kg a 2,1 mg/kg. No estudo de dissipação os valores de resíduos de mancozebe permaneceram praticamente inalterados enquanto que os níveis de ETU decaíram de 0,14 mg/kg para 0,04 mg/kg após 12 dias da aplicação. A estimativa da ingestão de resíduos de mancozebe e ETU pelo consumo de mamão foi de 1,0% e 0,7% da Ingestão Diária Aceitável (IDA), respectivamente. A presença de níveis de ETU em mamão alerta para a necessidade do conhecimento dos níveis presentes nos alimentos consumidos pela população.

Ethylenethiourea (ETU) is a degradation and/or biotransformation toxic substance from ethylene-bisdithiocarbamate (EBDC) fungicides. It is reasonably stable, has high solubility in water and may represent a risk to populations consuming fruits and other foods. Sufficient evidence is available to indicate that it is carcinogenic in animals, but the evidence is inadequate for hurnan beings. This study had the objective studying and validating analytical methods for determining dithiocarbamates and ETU levels in papaya; determining the levels of remaining residues of EBDC (mancozeb) from applications to papaya species Carica papaya L. cultivations and its metabolite ETU; determining the dissipation of these residues days after the application of mancozebe; and assessing the levels encountered and the risk to public health. The utilized method for determining the dithiocarbamates levels was spectrophotometry and determining ETU was high performance liquid chromatography. The samples were collected from three localities that are representative of papaya cultivation: Lins (São Paulo), Linhares (Espírito Santo) and the extreme south of Bahia The analytical methods assessed presented satisfactory results, The range of the recovery studies was from 70 to 110% for mancozeb, and from 80 to 110% for ETU. Depending on the level fortified, the coefficients of variation ranged from 3.7 to 13,3% for ETU and from 4,8 to 13,2% for mancozeb. The quantification limit for the method was 0.5 mg/kg for mancozeb and 0.01 mg/kg for ETU. All samples treated with mancozeb presented ETU residues ranging from 0.01 mg/kg to 0.32 mg/kg. The mancozeb levels ranged from 0.5 mg/kg to 2.1 mg/kg. In the dissipation study, the amounts of mancozeb residue remained practically unaltered, while the ETU levels fell from 0.14 mg/kg on the day of treatment to 0.04 mg/kg 12 days later. The contribution of the estimated mancozeb and ETU ingestion to the Acceptable Daily Ingestion (ADI) was 1,0% and 0.7%, respectively. Knowing that ETU is present in papaya serves as a warning for the need for knowledge of the levels present in foods consumed by the public.

Morphologic changes of intermediate filaments of ependymal cells in experimentally induced hydrocephalic rats / 대한해부학회지

Ependymal cells line the surface of cerebral ventricles. They do not regenerate after they are fully matured and have a limited response to injury. In hydrocephalus, the expansile force of the ventricular wall is applied to ependymal cells and causes cell deformity to some degree. As it is known that the intermediate filaments of a cell act as a framework that resists changes in cellular shape, there may be some detectable changes of intermediate filaments of ependymal cells in hydrocephalus. In developing ependymal cells, it is also unclear if there are any changes to intermediate filaments in hydrocephalus. Developing ependymal cells are known to lose their immunoreactivity to glial fibrillary acidic protein (GFAP), a kind of intermediate filaments which exist in some neuroglial cells. We experimentally induced congenital and postnatal hydrocephalus and investigated the changes of immunore-activity against GFAP as well as the ultrastuctures of rat ependymal cells in both types of hydrocephalus. To induce congenital hydrocephalus, 40 mg/kg of ethylenethiourea (ETU) was orally administered to pregnant rats on the 15th day after conception. Tissues taken from fetuses on the 17th day, from newborn rats immediately after birth, and from rats of 1 week and 2 weeks after birth were obtained and processed for immunohistochemistry for GFAP and electron microscopy. Postnatal hydrocephalus was induced by injecting kaolin suspension into the subarachnoid space of 15-day-old rats. Ependymal tissues were obtained and processed for immunohistochemistry and electron microscopy after 1 and 2 weeks following injection. The results were as follows; 1. Congenital hydrocephalus was induced more consistently and extensively than postnatal hydrocephalus. 2. In congenital hydrocephalus, GFAP-reactive ependymal cells were found in lateral ventricles of 1-week and 2-week-old rats, while in control and postnatal hydrocephalic groups, GFAP-reactive ependymal cells were not found. GFAP-reactive cells tended to be found in clusters. 3. Electron microscopy showed ependymal cells in congenital hydrocephalus had a less marked flattening figure, scarce apical cilia, often widened regions in the intercellular gap, spaces in subependymal tissue, and different figures in mitochondria. Above all, intermediate filaments, including GFAP, increased and were irregularly arranged in ependymal cell cytoplasm in congenital hydrocephalus. Therefore, in congenitally-induced hydrocephalus, the ependymal cells appeared to have a greater responsiveness to expansile force and remained in a more premature state than postnatally-induced hydrocephalus.

Uso de Plaguicidas en Cuba, su repercusión en el ambiente y la salud / Use of pesticides in cuba, its repercussion on environment and health

Se brinda información general acerca del uso de los plaguicidas en Cuba, los niveles de residuos en diferentes cultivos, así como una valoración sobre los datos de intoxicación aguda entre 1987 y 1995. Persisten concentraciones de etilen bisditiocarbamatos en muestras de tomate, cebolla y papa por encima de los límites máximos recomendados, establecidos en Cuba. Se analizan los diferentes factores que permiten argumentar sobre las posibles limitaciones de uso de los etilen bisditiocarbamatos en las cosechas, incluyendo los aspectos relacionados con la salud humana

Fungicidas etileno-bisditiocarbamatos: aspectos de genotoxicidade, carcinogenicidade e teratogenicidade / Ethylene-bisdithiocarbamate fungicides: aspects of genotoxicity, carcinogenicity and teratogenicity

Os fungicidas Etileno-bisditiocarbamatos (EBDC) sao utilizados na agricultura há mais de quarenta anos, principalmente em importantes culturas para consumo humano, tais como cereais, frutas e legumes. Entretanto, os efeitos adversos deste grupo de fungicidas sobre a saúde humana sao preocupantes, especialmente aqueles relacionados à mutagenecidade, carcinogenicidade e teratogenicidade. Quanto à mutagenecidade verifica-se a existência de uma série de resultados positivos em diferentes sistemas biológicos, como também alguns resultados negativos. Os testes de carcinogênese experimental em roedores apresentaram resultados positivos para a tireóide, e em nível de epidemiologia os dados ainda sao inconclusivos. Com relaçao à teratogenicidade tem-se um fator complicante, a etilenotiouréia (ETU), o principal produto de degradaçao dos fungicidas EBDC, que pode atingir quantidades de até 20 por cento durante tal processo. Assim, tanto os fungicidas EDBC como a ETU apresentam resultados positivos de teratogênese em roedores. Esta revisao discute tais especialidades toxicológicas dos fungicidas etilenobisditiocarbamatos.

Contribuiçäo para o estudo clínico-laboratorial e terapêutico da formaçäo juvenil da paracoccidioidomicose / Paracoccidioidomycosis: clinical and terapeutic study of the juvenil form of the disease

A paracoccidioidomicose é a micose sistêmica mais frequente na regiäo do Triângulo, no Estado de Minas Gerais. A maioria dos casos diagnosticados nesta localidade enquadra-se na forma adulta da moléstia (idade 30 anos), mas cerca de um terço (36,5 por cento ) do total de doentes corresponde a forma juvenil desta infecçåo (idade 30 anos), modalidade sabidamente de maior gravidade e com feiçöes clínico-laboratoriais bastante peculiares. No presente trabalho, realizou-se um estudo prospectivo com o objetivo de analisar detalhadamente os aspectos clínicos, laboratoriais e terapêuticos da forma juvenil desta micose, em 24 pacientes observados no período de fevereiro de 1982 a dezembro de 1987, no Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia. Este estudo permitiu ampla revisäo da literatura latinoamericana sobre o assunto e, com detalhes, destacou as características peculiares, como já referido, desta forma clínica, em particular: a) a raridade da doença na infância, notadamente, na primeira década de vida; b) a baixa proporçäo na incidência entre homens e mulheres (5/1) comparado com a relatada na forma adulta da moléstia (até 125/1); c) o elevado acometimento pelo fungo do sistema macrofágico-linfóide manifestado principalmente por linfadenopatia, localizada ou generalizada, hepatoesplenomegalia e envolvimento do tubo digestivo e do sistema ganglionar-mesentérico; d) a ocorrência menos frequente de lesöes cutâneo-mucosas, comumente vistas na forma adulta da micose; e) a presença de icterícia, ascite e massa abdominal palpável, alteraçÆes decorrentes do envolvimento quase constante do sistema linfático-abdominal; f) a raridade do acometimento pulmonar, habitualmente visto em pacientes de faixas etárias mais elevadas. O trabalho ainda salientou as alteraçöes laboratoriais decorrentes da doença, em particular a eosinofilia, e discutiu os resultados controversos das reaçÆes sorológicas específicas realizadas no decurso desta moléstia. O papel dos métodos de imagem, em particular, da ultrasonografia foi destacado, pelas importantes informaçÆes que trouxe em relaçåo ao acometimento extremamente frequente dos orgåos intra-abdominais pelo P. brasilienses, tendo sido recomendado sua utilizaçåo rotineira na avaliaçäo inicial e evolutiva destes pacientes. Finalmente, este estudo mostrou os resultados terapêuticos obtidos com os sulfamídicos, com a Anfotericina B e, particularmente com o Ketoconazol nesta modalidade da micose, enfatizando a excelente resposta observada com este derivado imidazólico, que permitiu alcançar remissÆes em curtos períodos de tempo e com mínimos efeitos colaterais, mesmo em forma relativamente graves desta doença

The imidazoline receptors and the central regulation of the arterial blood pressure: a minireview

Recently, we proposed the hypothesis according to wich the central hypotensive effect of clonidine and related substances could be related to an action upon specific receptors, requiring the imidazoline or imidazoline-like structures, rather than alpha2-adrenoceptors. Since then, direct evidences have been accumulated to confirm the existence of a population of imidazoline specific binding sites in the brainstem of animals and man, more precisely in the Nucleus Reticularis Lateralis (NRL) region of the ventrolateral medulla (VLM), site of the antihypertensive action of clonidine. The purification of the putative endogenous ligand of the imidazoline receptors - named endazoline - is currently being attempted from human brain extracts. This new concept might at last lead to the expected dissociation of the pharmacological mechanisms involved, on the one hand, in the therapeutic antihypertensive effect, and on the other, in their major side-effect, which is sedation. In fact, it has been recently confirmed that hypotension is mediated by the activation of imidazoline preferring receptors (IPR) within the NRL region, while sedation is attributed to the inhibition of alpha2-adrenergic mechanisms in the locus coeruleus, which is involved in the control of the sleep-waking cycle. The IPRmay constitute on interesting target for new drugs in the treatment of arterial hypertension. Finally, dysfunctions of this modulatory system which could be involved in the pathophysiologyof some forms of the hypertensive disease are under investigation

Efeitos da etileno-tiouréia (ETU) e da etileno-uréia (EU) sobre os níveis de lipoperoxidaçäo hepática em ratos / Effects of ethylen-thiourea (ETU) and of ethylene-urea (EU) on hepatic lipid peroxidation levels

A etileno-tiouréia (ETU) administrada a ratos exerce um efeito protetor contra a peroxidaçäo de lipídios hepáticos, medida pela produçäo de malonildialdeído. Esse efeito é dose e tempo dependente e deve-se provavelmente a presença de um grupo tiol na molécula da ETU, uma vez que a etileno-uréia (EU) um composto semelhante a ETU, mas que näo contém S näo altera a peroxidaçäo de lipídios em fígado. O maneb, um fungicida do grupo dos etilenobisditiocarbamatos na dose empregada (5.000 ppm na dieta), näo é täo eficaz quanto a ETU na proteçäo da peroxidaçäo de ácidos graxos polinsaturados de membranas, em fígado, embora esta seja produzida "in vivo" durante a biotransformaçäo do maneb